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BL 698 A蛍光定量PCRキット(5 X 1 mL)
Biosharp BL 698 A蛍光定量PCRキット(5 X 1 mL)は、SYBR Green Iキメラ蛍光法を用いてReal Time PCRを行うための専用試薬であり、熱起動Taq DNAポリメラーゼ、dNTP、SYBR Green Iなどの試薬を即使用の2 x Mixに予備混合し、目標cD
製品の詳細

Biosharp BL 698 A蛍光定量PCRキット(5 X 1 mL)

メーカー紹介:

Biosharp BL 698 A蛍光定量PCRキット(SYBR Green qPCR Mix)

ブランド:biosharp

商品番号:BL698A

仕様:5X1mL

本製品はSYBR Green Iキメラ蛍光法を行うReal Time PCRの専用試薬を用いて、熱を始動させるTaq DNAポリメラーゼ、dNTPSYBR Green I等試薬を予備混合したもの2x Mix、ターゲットcDNA迅速で特異性の高い定量的検出を行う。本製品は化学修飾を用いたHot Start Taq DNAポリメラーゼ50 ℃以下は活性がなく、ただ95 ℃条件下で加熱してこそ酵素の活力を完全に回復することができ、Z非特異的増幅産物の生成を大幅に減少させ、蛍光定量を向上させるPCR反応の精度。このキット独特の反応緩衝液は、広い範囲で良好な増幅結果を得ることができ、検出感度がより高く、信号がより強い。

製品構成要素:

製品番号

製品名

仕様

1

2×SYBR Green qPCR Mix

5x1ml

2

50×ROX Reference Dye

1ml

条件の保存

本製品を受け取ったら、すぐに-20℃遮光保存、1年間有効28℃じょうけんちょぞう6ヶ月複数回の凍結融解を避ける。

使用方法

一、調製Real-Time PCR反応系:

1、すべての試薬を2×SYBR Green qPCR MixROX Reference Dye、テンプレート、プライマー、およびRNase-Free ddH2O、室温で融解して完全に混和する気泡の発生を避ける短い遠心分離後、氷の上に置く以下の表に従って反応液を調製した。

以下の表を参照して反応系を調製する:

コンポーネント

20ulシステム

しゅうのうど

SYBR Green qPCR Mix

10μl

Primer F (10 μM)*

0.4~0.8 μl

0.2~0.4 uM*

Primer R (10 μM)*

0.4~0.8 μl

0.2~0.4 uM*

50 x ROX Reference Dye**

cDNAテンプレート

--

RNase-Free ddH2O

終了20 μl

* 一般的に、反応系中のプライマーの最終濃度は0.2 uM優れた増幅効果を得ることができます。反応性が比較的悪い場合は、最終濃度0.2~0.4 uM範囲内でプライマー濃度を調整する。

** いくつかの一般的な計器のZ適性ROX Reference Dye濃度は次の表を参照:

計器型番

しようのうど

ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/StepOne/StepOnePlusなど

ABI 7500/7500 FastQuantStudio ® 3/5QuantStudio 6/7 FlexViiA 7Stratagene Mx3000P/Mx3005PMx4000など

RocheBio-RadEppendorfなど

追加する必要はありません

2、反応管を蓋または密封する/PCRプレート、軽く混ぜる。すべての成分がチューブに入っていることを確認するための短い遠心分離/板底。

二、行うReal-Time PCRはんのう

1二段階法を提案するPCR反応手順は反応を行う。

にだんほうはんのうルーチン:

ステップ

おんど

継続時間

サイクル数

よへんせい

95℃

5min

1

へんせい

95℃

10sec

40

アニール延長データ収集

60℃

30sec

40

ようかいきょくせんかいせき

機器推奨プログラムによる設定

テンプレート量が低いなどの要因により増幅効果が不十分であり、三段階法プログラムを用いて行うことができるPCR反応。

さんだんほうはんのうルーチン:

ステップ

おんど

継続時間

サイクル数

よへんせい

95℃

5min

1

へんせい

95℃

10sec

40

やきなまし

50-60℃

30sec

40

拡張データ収集

72℃

30sec

40

ようかいきょくせんかいせき

機器推奨プログラムによる設定

2機械的検査:反応系を蛍光定量に置くPCR計では、プログラムを実行してデータを収集し、結果を分析します。

Biosharp BL 698 A蛍光定量PCRキット(5 X 1 mL)

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